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高效毛细管电泳色谱仪与质谱仪联用的接口技术

发布时间:2021-10-22 04:03:17 阅读: 来源:点焊机厂家

2016072812:00:07来源:中国振动机械网

高效毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,具有高效、分辨率高、重复性好、速度快和易于自动化等优点。质谱仪(MS)是通过对样品离子的质量和强度的测定进行定量和结构分析,具有灵敏度高和速度快等优点。CE与MS联用综合了两者的优点,是分析生物大分子的有力工具。在CE-MS联用中,毛细管区带电泳较为常用,其它如毛细管凝胶电泳、毛细管胶束电动色谱、毛细管等电聚焦电泳和毛细管等速电泳等应用较少。电子喷雾离子化(ESI)可用于检测多种高质量的带电分子,从CE分离出来的分子经过接口可直接进入MS,是MS专业的离子源。

CE-ESI-MS接口的目标是获得稳定的雾流和高效的离子化,是影响整个检测的关键因素之一。由于CE需要较高离子强度和挥发性低的缓冲液,而ESI需要较低盐浓度才能获得好的雾化和离子化。因此,接口技术必须优化,以尽可能提供好的电子接触,尽量减少对CE分离效率的影响。此外,每一种接口应选择相应的缓冲液。CE-ESI-MS接口有同轴液体鞘流接口、无鞘接口和液体连接接口三种类型。一、同轴液体鞘流接口:同轴液体鞘流接口是连接CE与ESI-MS较常见的接口。1、结构:在CE毛细管末端外套一个同心不锈钢毛细管套,内充鞘液。在此不锈钢套外再套一个同心不锈钢套免费的离婚法律咨询,内通鞘气。鞘液和CE缓冲液在毛细管的高端混合,同时被鞘气雾化。鞘液流量通常为每分钟数纳升至数微升,显著高于CE的流速。由于鞘液的稀释作用,使雾流稳定性得到改善。理想的鞘液缓冲液的盐浓度应在高分离(高盐浓度)和高雾化(低盐浓度)之间进行优化。由于鞘液在雾化过程中完整蒸发,鞘液的稀释作用并不显著降低检测灵敏度,但混合液体的体积应尽可能小,以避免谱带展宽。2、特点:由于鞘液对CE流出物的稀释作用而降低检测灵敏度,鞘液的成分和浓度对CE分离均有影响。二、无鞘接口:1、结构:将CE毛细管末端做成尖细状,以获得稳定的电子雾化。在CE毛细管末端外套一个同心毛细管套,内通鞘气。此接口的难点是不易同时保持CE和ESI的电路循环起诉离婚诉讼,为此,在毛细管末端粘上金丝或镀一层金,但金的粘着力差,易被机械的和电子的原因除去。2、特点:接口性能差且寿命短。三、液体连接接口:1、结构:将CE毛细管末端与一个直径为10~20mu;m的槽垂直相连,槽内充有CE缓冲液。与毛细管末端相对的槽的另一端接上ESI。2、特点:可通过任意调节槽内液体流速以改善ESI效果,而这通常是以谱带展宽和分离效能降低为代价取得的。此接口技术难度较大,现仅用于芯片CE与MS联用中。CE-MS联用大大拓宽了CE和MS的应用领域,但CE固有的缺陷并未克服。在DNA分离时,极高的电场强度容易使较长的DNA发生伸展改变呈棒状,而降低分离效果。现有的接口类型都有不同程度的缺陷,随着接口技术的不断改进、芯片CE与MS联用技术的完善和新浓缩技术(如分子印迹)的应用,CE-MS在蛋白质组学、化学药物研究和临床实验诊断等领域已显示了广阔的前景,正成为分析工作者的重要工具之一。